Metabolic Imaging by Simultaneous FLIM of NAD(P)H and FAD

我们描述了基于同时记录NAD(P)H和FAD的荧光寿命图像的代谢成像系统。我们以人膀胱细胞为例演示了该系统的性能。正常组织和发炎组织与肿瘤组织清楚地区分开,随后由组织学结果证实。

日期:2020年8月27日,星期四,北京时间晚上8点

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我们描述了基于同时记录NAD(P)H和FAD的荧光寿命图像的代谢成像系统。该系统使用bh TCSPC FLIM技术的多维记录功能。将两个激发波长复用以交替激发NAD(P)H和FAD。一个FLIM通道在NAD(P)H的发射带中检测,另一个在FAD的发射带中检测。FLIM数据由SPCImage数据分析软件处理。对于两个通道,数据分析都会提供振幅加权寿命tm,组分寿命t1和t2,组分振幅a1和a2以及振幅比a1 / a2的图像。此外,它还提供了荧光寿命氧化还原比(FLIRR),a2 nadh / a1 fad。我们以人膀胱细胞为例演示了该系统的性能。从膀胱中切除组织后立即从细胞中获取FLIM。之后,通过组织学评估样品。在tm图像,a1和a2图像以及FLIRR图像中区分正常细胞和肿瘤细胞。事实证明,可靠的判别参数是NAD(P)H荧光的振幅a1和a2。正常组织和发炎组织与肿瘤组织清楚地区分开,随后由组织学结果证实。同样,来自FAD通道的FLIM数据显示正常组织和肿瘤组织也存在显着差异。但是,FAD结果与NAD(P)H的结果不一致。因此,对FAD FLIM数据的解释需要进一步研究。通过组织学评估样品。在tm图像,a1和a2图像以及FLIRR图像中区分正常细胞和肿瘤细胞。结果可靠的判别参数是NAD(P)H荧光的振幅a1和a2。正常组织和发炎组织与肿瘤组织清楚地区分开,随后由组织学结果证实。同样,来自FAD通道的FLIM数据显示正常组织和肿瘤组织也存在显着差异。但是,FAD结果不如NAD(P)H一致。因此,对FAD FLIM数据的解释需要进一步研究。通过组织学评估样品。在tm图像,a1和a2图像以及FLIRR图像中区分正常细胞和肿瘤细胞。结果可靠的判别参数是NAD(P)H荧光的振幅a1和a2。正常组织和发炎组织与肿瘤组织清楚地区分开,随后由组织学结果证实。同样,来自FAD通道的FLIM数据显示正常组织和肿瘤组织也存在显着差异。但是,FAD结果与NAD(P)H的结果不一致。因此,对FAD FLIM数据的解释需要进一步研究。

 

关于演讲者

网络研讨会:NAD(P)H 和 FAD同时进行FLIM代谢成像

Wolfgang Becker是时间分辨光学检测技术的专家。他于1979年在德国柏林获得博士学位。自1993年以来,他是柏林Becker&Hickl GmbH的负责人。他感兴趣的领域是高级时间相关单光子计数技术的开发和应用。他于1989年开始开发多维TCSPC技术,并且是TCSPC FLIM技术的创始人,该技术现已广泛用于激光扫描显微镜。他是bh TCSPC手册的作者,该手册现已在第8版发布,并且是“高级单光子计数技术”(Springer,2005年)的作者,也是“高级单光子计数应用程序”(Springer,2015年)的编辑。他喜欢猫,滑雪和沙滩排球。